阿仑膦酸钠和甲状旁腺素对糖皮质激素性骨丢失的作用

摘要：目的 比较并探讨甲状旁腺素和阿仑膦酸钠治疗糖皮质激素性骨质疏松(GIOP)的疗效和作用机制.方法 动物实验:将40只9月龄雄性SD大鼠分为对照组:0.9%氯化钠注射液皮下注射;糖皮质激素(GC)组:甲泼尼龙琥珀酸钠2.5 mg/kg·d皮下注射;GC +双膦酸盐组:甲泼尼龙琥珀酸钠2.5 mg/kg·d皮下注射+阿仑膦酸钠4 mg/kg·d灌胃;GC+甲状旁腺激素(PTH)组:甲泼尼龙琥珀酸钠2.5 mg/kg·d皮下注射+rPTH 80 μg/kg·d皮下注射.所有动物喂养3个月后处死.采用双能X线骨密度仪检测大鼠腰椎和股骨骨密度,用骨形态计量学方法分析大鼠股骨力学参数,收集外周血检测抗酒石酸酸性磷酸酶和骨钙素.细胞实验:将原代培养大鼠成骨细胞分为对照组; GC组:地塞米松(Dex)10-5 mol/L;阿仑膦酸钠(ALN)组:ALN 10-7 mol/L;PTH组:人重组PTH1-34 10-7 mol/L;GC+ALN组:Dex 10-5 M+ALN 10-7 mol/L;GC+PTH组:Dex 10-5mol/L+PTH 10-7 mol/L;分别采用MTT、碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色法观察各组成骨细胞的增殖、分化和矿化情况;采用Real-time PCR检测各组成骨细胞FGF23和SOST基因表达情况.结果 动物实验结果显示,GC组大鼠腰椎骨密度(0.232±0.021)和股骨骨密度(0.203±0.018)较各自对照组(0.247±0.03和0.226±0.037)明显降低(P＜0.05);GC+ALN组股骨骨密度(0.224±0.03)和GC+PTH组腰椎骨密度(0.271±0.018)较GC组明显升高(P＜0.05).与对照组相比,GC组骨小梁容积、骨形成率、矿化沉积率和血BGP明显降低(P＜0.05),破骨细胞表面积和血TRAP5b明显升高(P＜0.05).GC+PTH组骨小梁容积显著增加(P＜0.05),GC+ALN组骨小梁容积与对照组持平.与GC组相比,GC+PTH组骨形成率和血BGP明显升高(P＜0.05),GC+ALN组矿化沉积率升高(P＜0.01),破骨细胞表面积和血TRAP5b降低(P＜0.05).细胞实验结果显示,GC可降低成骨细胞的增殖率和碱性磷酸酶活性,减少矿化结节形成(P＜0.05),GC+PTH和GC+ALN使碱性磷酸酶活性升高至对照组水平,但PTH能著抑制矿化,ALN促进矿化.Realtime-PCR结果提示经GC干预后骨硬化蛋白(SOST)和纤维生长因子23(FGF23)表达显著升高(P＜0.05),PTH抑制SOST表达(P＜0.01),ALN抑制SOST和FGF23的表达(P＜0.05).结论过量GC可增加SOST和FGF23表达,与糖皮质激素性骨质疏松的骨形成降低和骨矿化受损有关.PTH和ALN可提高骨量,改善骨强度; PTH可降低SOST表达,促进骨形成;ALN可降低FGF23表达,促进骨矿化.